液相流動相調(diào)整原則如下：

1. 由強(qiáng)到弱：一般先用90%的乙腈或甲醇-水或緩沖溶液進(jìn)行試驗，可很快得到分離結(jié)果，然后根據(jù)出峰情況調(diào)整有機(jī)溶劑（乙腈或甲醇）的比例。
2. 三倍規(guī)則：每減少10%的有機(jī)溶劑（乙腈或甲醇）的量，保留因子增加約3倍，此為三倍規(guī)則。調(diào)整時注意觀察各個峰的分離情況。
3. 粗調(diào)轉(zhuǎn)微調(diào)：當(dāng)分離達(dá)到一定程度時，應(yīng)將有機(jī)溶劑（乙腈或甲醇）10%的改變量調(diào)整為5%，并據(jù)此規(guī)則逐漸降低調(diào)整率，直至各組分的分離情況不再改變。
4. 流動相應(yīng)不改變填料的任何性質(zhì)。低交聯(lián)度的離子交換樹脂和排阻色譜填料有時遇到某些有機(jī)相會溶脹或收縮，從而改變色譜柱填床的性質(zhì)。堿性流動相不能用于硅膠柱系統(tǒng)。酸性流動相不能用于氧化鋁、氧化鎂等吸附劑的柱系統(tǒng)。
5. 純度。色譜柱的壽命與大量流動相通過有關(guān)，特別是當(dāng)溶劑所含雜質(zhì)在柱上積累時。
6. 必須與檢測器匹配。使用UV檢測器時，所用流動相在檢測波長下應(yīng)沒有吸收，或吸收很小。當(dāng)使用示差折光檢測器時，應(yīng)選擇折光系數(shù)與樣品差別較大的溶劑作流動相，以提高靈敏度。