當色譜柱進空氣時，可以采取以下步驟來解決問題：

### 一、理解現(xiàn)象

首先，需要明確的是，如果流動相沒了，泵的確會吸進去一些空氣，但并不會持續(xù)地讓空氣流經(jīng)整個系統(tǒng)。HPLC（高效液相色譜）的泵是專門設計來吸取液體的，一旦空氣進入，泵就會失去灌注（lose prime）并停止工作。因此，雖然一些氣泡可能會進入柱子，但這種情況不會一直持續(xù)。

### 二、處理措施

#### 1. 排氣準備

* **取下色譜柱**：在排氣之前，最好將色譜柱從系統(tǒng)中取下來，以避免在排氣過程中對色譜柱造成不必要的沖擊。
* **更換流動相**：換上新的、徹底脫氣后的流動相。脫氣是為了減少流動相中的溶解氣體，避免在排氣過程中產(chǎn)生更多的氣泡。

#### 2. 清除泵和管道中的空氣

* **打開排氣閥**：進行正常灌注（prime the pump），確保泵能夠重新建立灌注。對于某些型號的儀器，可能需要使用注射器進行手動灌注。
* **設定高流速**：設定一個較高的流速（如10 mL/min），并運行幾分鐘，以徹底清除泵里面以及管道里面殘留的空氣。
* **調整流速**：將流速調至1 mL/min，并關閉排氣閥，繼續(xù)運行直到徹底沒有氣泡排出。

#### 3. 清除色譜柱中的空氣

* **連接柱子**：將色譜柱進口端連接好，出口端不要接檢測器，而是接上一段管道，并用燒杯或廢液瓶收集排出來的流動相。
* **逐步增大流速**：啟動泵并逐步增大流速，直到柱壓達到3000-4000 psi（高壓能夠將氣泡壓縮回溶液并排出柱子）。持續(xù)運行10分鐘左右，直到?jīng)]有氣泡從柱子的尾端排出。

#### 4. 沖洗系統(tǒng)

* **更換流動相**：將流動相換成100%的甲醇或乙腈，這兩種有機溶劑的粘度相對較低，有助于清除系統(tǒng)管道和色譜柱中的殘留空氣。
* **沖洗柱子**：用甲醇或乙腈沖洗色譜柱一段時間，確保柱子中的空氣被完全清除。

### 三、后續(xù)檢查

* **檢漏**：排氣完成后，要特別注意檢查系統(tǒng)是否有泄漏。如果沒有觀察到明顯的泄漏，要注意觀察泵在正常運行下的柱壓是否正常和穩(wěn)定。如果柱壓沒有問題，就說明泵和系統(tǒng)是正常的。
* **更換密封墊**：如果觀察到柱壓偏低或波動，可能是密封墊磨損所致，此時需要更換密封墊。

### 四、注意事項

* 在處理過程中，要避免對色譜柱造成物理損傷或化學污染。
* 如果色譜柱因長期儲存而變干燥，也可以使用上述方法使其恢復良好狀態(tài)。
* 不同的色譜柱和儀器可能需要不同的處理方法和步驟，因此在實際操作中應根據(jù)具體情況進行調整。

通過以上步驟，可以有效地解決色譜柱進空氣的問題，并確保色譜系統(tǒng)的正常運行和分析結果的準確性。